Отложить «про запас» для длительного хранения в замороженном виде
При наличии большого количества выращенных (культивированных) клеток сделать и то и другое.
В данном разделе мы расскажем о подготовке биологического продукта для длительного хранения. Известны два принципиально различных типа сохранения биологических продуктов - криопрезервация (замораживание) и лиофилизация (высушивание). В настоящее время доказано, что замораживание является более эффективным способом хранения любого биологического объекта.
Понятно, что все усилия биотехнологов должны быть направлены на то, чтобы процессы замораживания-хранения-размораживания не привели к гибели, механическому повреждению и, что не менее важно, утрате клетками основных функциональных свойств. Дело в том, что при воздействии низких температур , обменные процессы, происходящие в клетке, практически полностью останавливаются. Клетка как бы замирает до лучших времен. К сожалению, при замораживании из внутриклеточной воды образуются кристаллы льда, которые своими острыми гранями повреждают внутриклеточные мембраны. Поэтому на подготовительном этапе вытесняют воду из клетки, заменяя ее специальными веществами – криопротекторами, которые в процессе замораживания формируют кристаллы гораздо меньших размеров, чем вода. Доказано, что кристаллы, образующиеся в результате замерзания криопротекторов, не способны повредить внутриклеточные мембраны.
Непосредственно процесс замораживания также является сложной процедурой, которая производится в течении нескольких часов по специальным компьютерным программам, учитывающим тип и количество клеток, а также физико-химические особенности используемого криопротектора. Разработанные программы позволяют максимально сохранно заморозить любой тип клеток, как незрелых (стволовых), так и зрелых (высокоспециализированных, дифференцированных). МЦБ «БИОСТЭМ» для этих целей использует современный программный замораживатель с набором индивидуальных программ фирмы PHILIPS Computer Freezer IceCube 1810. Постепенное снижение температуры до минус ста девяноста шести градусов по Цельсию (температура жидкого азота) позволяет без ущерба для клеток перенести биологический продукт в криобанк для долговременного хранения.
