После получения первичной культуры - суспензии (взвеси клеток), определения их количества и качества может сложиться ситуация, когда функционально полноценных клеток недостаточно для лечения какого-либо заболевания. и/или длительного хранения. Дело в том, что для лечения и/или хранения необходимо от 0,5 до 200 миллионов клеток. В такой ситуации требуется выполнение еще одного очень ответственного этапа в создании биологического продукта - культивирования. Суть этого этапа состоит в увеличении количества необходимых клеток путем их размножения.
Для этой цели клеточную суспензию помещают в пластиковые емкости (культуральные флаконы) и вносят в него растворы, содержащие необходимые питательные вещества и факторы роста (культуральные среды). Затем культуральные флаконы помещают в биореактор (СО2 - инкубатор), который способен в течение нескольких недель и даже месяцев поддерживать нужную температуру, влажность, кислотность и т.д. В процессе культивирования производится периодический контроль состояния растущих клеток, а также смена питательных сред.
Время культивирования в СО2 - инкубаторе индивидуально для каждого отдельного случая и зависит от множества факторов. В частности, какие клетки пускаются в рост, их исходного количества и качества, возраста и состояния здоровья пациента, а также поставленных задач (использование клеток для лечения (омоложения) и/или длительного хранения). В зависимости от перечисленных факторов длительность культивирования колеблется от 2-х до 8 недель. Как правило, на этапе культивирования добиваются увеличения числа клеток в 100 и более раз в сравнении с начальным количеством.
Следует заметить, что методика культивирования позволяет получить только прямое потомство, т.е. просто увеличить количество одних и тех же клеток, а не создает из одного типа клеток другие (из менее зрелых – более зрелые). Эти задачи решают с помощью направленной дифференцировки клеток.
